Làm thế nào một gen đã được cắt rời có thể liên kết được với thể truyền là plazmit đã được mở vòng khi người ta trộn chúng lại với nhau để tạo ra phần tử ADN tái tổ hợp?
Sau khi gen cần chuyển và thể truyền được cắt chúng đã có đầu dính bổ sung với nhau. Khi trộn chúng lại với nhua thì theo nguyên tắc bổ sung thì chúng sẽ kết cặp với nhau. Đồng thời để nối liền mạch của gen cần chuyển và mạch của thể truyền người ta bổ sung thêm enzym nối ligaza để tạo mối liên kết hóa trị giữa nucleotit trên thể truyền và nucleotit trên gen cần chuyển